Bacillus subtilis Tespiti İçin Test Yöntemleri
B. subtilis
Bacillus subtilisyem endüstrisinde, özellikle üretiminde ve ayrıca üretimden sonra katkı maddesi olarak sıklıkla kullanılan yaygın bir mikroorganizmadır. Tespiti, yemin kalitesini ve güvenliğini sağlamak için çok önemlidir. Aşağıda çeşitli tespit yöntemleri, koşulları ve test standartlarına ilişkin ayrıntılı bir giriş sağlanacaktırBacillus subtilisbeslemede. Her yöntemin kendine özgü avantajları ve dezavantajları vardır, bu nedenle kullanıcı uygulamanın özel durumunu ve senaryosunu hesaba katmalıdır.
Geleneksel Yetiştirme Yöntemi
Örnek işleme: Belirli miktarda örneği tartın, karıştırma için seyreltici ekleyin ve numunenin salınmasını ve dağılmasını sağlamak için ultrasonik işlem uygulayın.Bacillus subtilis.
Seyreltme: İşlenmiş numuneyi, numunenin her seyreltmesinin kültür ortamına eşit şekilde kaplanabilmesini sağlamak için gradyanla seyreltin.
Aşılama: Seyreltilmiş numuneyi besin agar plakasına uygulayın, analiz numarasını, tarihi ve seyreltme seviyesini etiketleyin.
Kültür: Aşılanmış plakaları 37 ℃ sabit sıcaklıktaki inkübatöre 16-20 saat yerleştirin ve bakteri kolonilerinin büyümesini gözlemleyin.
Koloni özelliklerinin gözlenmesi: KolonilerBacillus subtilisKatı kültür ortamında genellikle pürüzlü ve düzensiz şekiller sergilerler, daha büyük süt beyazı ila gri beyaz koloniler oluştururlar.
Biyokimyasal tanımlama: Oksidaz testi, katalitik enzim testi, jelatin sıvılaştırma testi ve nitrat indirgeme testi gibi bir dizi biyokimyasal test yoluyla, izole edilen bakterilerin daha fazla doğrulanmasıBacillus subtilis.
Moleküler Biyoloji Yöntemi
PCR tespiti: VarlığıBacillus subtilispolimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ile spesifik gen dizisinin çoğaltılmasıyla tespit edilir. Bu yöntem yüksek hassasiyete ve güçlü özgüllüğe sahiptir, ancak pahalı ekipman ve profesyonel bilgi gerektirir.
Floresan kantitatif PCR (qPCR): Varlığın kantitatif olarak tespitiBacillus subtilisYüksek hassasiyet ve özgüllüğe sahip, ancak aynı zamanda profesyonel ekipman ve operasyonel bilgi gerektiren, spesifik gen dizilerinin çoğaltılmasıyla gerçekleştirilir.
İmmünolojik Yöntemler
Enzim bağlantılı immünosorbent testi (ELISA): İçeriği dolaylı olarak yansıtırBacillus subtilisantijenlerle bağlanma reaksiyonlarını tespit ederek bir örnekteki spesifik antikorları tespit etmek. Bu yöntem yüksek duyarlılığa sahiptir, ancak reaktiflerin ve deneysel prosedürlerin kalitesinden etkilenebilir.
İmmüno-manyetik Boncuk Yöntemi: İmmüno-manyetik boncukları kullanarak,Bacillus subtilisve sonra tespit gerçekleştirin. Bu yöntem de yüksek hassasiyet ve özgüllüğe sahiptir, ancak işlem daha karmaşıktır.
